Las biopsias pueden ser:
- Percutáneas o por punción: cuando se utiliza una jeringa diseñada especialmente para el procedimiento y, generalmente, se utiliza anestesia local.
- Abierta: se realiza una cirugía donde se obtiene un trozo de tejido, utiliza anestesia general.
- Cerrada: se realiza una pequeña incisión en la piel, y a través de este se obtiene la muestra, puede utilizarse tanto anestesia local como general.
La médula ósea se encuentra en la zona central de los huesos largos, generalmente la muestra se toma por biopsia percutánea desde los huesos ilíaco o esternón.
Previo a la toma de la biopsia puede obtenerse un “aspirado” de médula ósea.
Procesamiento de rutina de la muestra: (Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Clínico Universidad de Chile)
- Fijación en formaldehido al 4% por al menos 24 hrs.
- Descalcificación con ácido nítrico al 7% por alrededor de 2 hrs.
- Deshidratación en Auto-técnico con paso por etanoles en grados ascendentes, xilol o xileno y luego parafina.
- Inclusión definitiva
- Obtención de 4 cortes
- Realización de las técnicas de hematoxilina/eosina, reacción de Pearls, técnica de Gomori para fibras reticulares y Giemsa
Técnicas de rutina aplicadas en el Servicio de Anatomía Patológica del Hospital Clínico Universidad de Chile
Hematoxilina-Eosina (H/E): corresponde a la técnica de rutina que se utiliza para observar todos los cortes histológicos, no sólo los de médula ósea.
Se utilizan los colorantes: Hematoxilina de Harris como tinción nuclear y Eosina al 1% como colorante citoplasmático.
Los núcleos se tiñen morados, mientras que los citoplasmas se tiñen rosados.
Tinción para Hierro (Azul de Prusia o Reacción de Pearls): permite detectar sangre “antigua” en el corte. Se basa en la detección de iones férricos generados con ácido clorhídrico; los cuales se hacen reaccionar con ferrocianuro de potasio, generándose ferrocianuro férrico (azul de Prusia).
Los gránulos de hemosiderina se tiñen de color azul verdoso, los núcleos se tiñen rojos si se utiliza rojo neutro 1% como contraste nuclear.
Tinción para fibras de Reticulina (técnica de Gomori): esta técnica permite identificar estructuras capaces de reducir la plata, entre ellas tenemos a las fibras reticulares (colágeno tipo III). Utiliza Plata Amoniacal.
Las fibras reticulares se observan negras si es que se utilizó cloruro de oro para “virar” el color café de la plata.
Tinción de técnica de Giemsa: permite la detección de bacterias y otros microorganismos; así como la detección de zonas con una gran cantidad de DNA. Utiliza azul de metileno y eosina.
Los citoplasmas se observan rosados pálidos (también los eritrocitos), mientras que los núcleos se tiñen morados; los gránulos eosinófilos se observan rojo intenso.
Los parámetros generales que se deben evaluar para la observación de una biopsia de médula ósea son:
- Celularidad: relación entre las células hematopoyéticas y el tejido adiposo, se expresa en porcentaje. Varía con la edad y el hueso en estudio; para la cresta ilíaca se clasifica como:
- Hipocelularidad: menos del 25%
- Hipercelularidad: más del 75%
- Relación Mieloide/Eritroide: normalmente es de entre 1,5:1 y 3:1. Clasificaciones:
- Hiperplasia eritroide: menor a 1,5:1 e hipercelularidad
- Hipoplasia eritroide: mayor a 3:1
- Maduración de la serie mieloide
- Maduración de la serie eritroide
- Porcentaje de basófilos, eosinófilos y mastocitos
- Número de megacariocitos
- Presencia de linfocitos, células plasmáticas e histiocitos
- Alteraciones en los vasos sanguíneos
- Anormalidades óseas
- Presencia de hemosiderina
- Alteraciones del estroma (Ejm: fibrosis, necrosis, granulomas)
